Panguna nga pasiuna
Ang Erythrocyte lysate maoy usa sa pinakayano ug sayon nga pamaagi sa pagtangtang sa pula nga mga selula sa dugo, nga mao, ang pagbahin sa pula nga mga selula sa dugo nga adunay lysate, nga dili makadaut sa mga nucleated cells ug hingpit nga makatangtang sa pula nga mga selula sa dugo. Ang lysate cleavage usa ka malumo nga pamaagi sa pagtangtang sa pula nga selyula sa dugo, nga gigamit alang sa pagbulag ug pagputli sa mga selyula sa tisyu nga gipatibulaag pinaagi sa pagtunaw sa enzyme, pagbulag ug pagputli sa mga lymphocyte, ug ang pagtangtang sa pula nga mga selyula sa dugo sa mga eksperimento sa protina sa tisyu ug nucleic. pagkuha sa acid. Ang mga selula sa tisyu nga nakuha sa lysate sa pula nga mga selyula sa dugo wala maglangkob sa pula nga mga selyula sa dugo, ug mahimo pa nga magamit alang sa panguna nga kultura, pagsagol sa cell, pag-agay sa cytometry, pagbulag ug pagkuha sa nucleic acid ug protina, ug uban pa.
Mga panudlo alang sa paggamit
Sampol sa tissue cell
1. Ang presko nga mga tisyu gitunaw sa pancreas/enzyme o collagenase ug gisabwag ngadto sa single cell suspension, ug ang supernatant gilabay pinaagi sa centrifugation.
2. Kuhaa ang ELS lysate gikan sa refrigerator sa 4â, idugang ang ELS lysate sa cell precipitate sa ratio nga 1:3-5 (idugang ang 3-5ml nga lysate sa 1ml nga cell compacted), hinayhinay nga huypa ug isagol.
3. Centrifuge sa 800-1000rpm sulod sa 5-8 ka minuto ug ilabay ang ibabaw nga pula nga tin-aw nga likido.
4. Ang precipitated nga bahin gikolekta ug centrifuge sa Hank's solution o serum-free culture solution sulod sa 2-3 ka beses.
5, kung ang pag-crack dili kompleto/kompleto mahimong balikon ang mga lakang 2 ug 3.
6. Resuspension cells para sa sunod nga mga eksperimento; Kung makuha ang RNA, labing maayo nga buhaton kini sa solusyon nga giandam gikan sa Lakang 4 gamit ang tubig sa DEPC
Pula nga mga selula sa dugo adunay usa ka mubo kaayo nga siklo sa kinabuhi, lamang sa 120 ka adlaw, apan sila mosanay sa dugo kaayo sa madali, ug sa niini nga kaso sila mao ang ilabi na nga makahimo sa cell division, ug sila mao ang labing paspas nga pagbahin sa mga selula sa tanan, mao nga kini nga selula mao ang kaayo bililhon, busa kini mapuslanon kaayo alang sa cell culture. Yano ra kaayo, wala kini mga organel, mga lamad sa selula ug protina.